（4）绿豆多肽抗氧化性与酶解光阴的面法关连

经由单因素试验的服从，可能筛选出各因素的优化艺三个水平。以是绿豆在此根基之上，运用统计合成软件建树4因素3水平的抗氧Box—Behnken模子，妨碍回应面优化妄想试验条件妨碍试验，化肽修正酶解光阴服从见4所示。备工

由图4可知，面法当反映光阴不逾越2h，优化艺DPPH翦灭率与温度成正比，绿豆当反映光阴逾越2h，抗氧DPPH翦灭率与温度成正比，化肽在2h时DPPH翦灭率抵达峰值。备工当水解的面法光阴过短时，绿豆卵白大份子不水解成具备小份子生物活性的优化艺生物活性肽，因此水解物DPPH的绿豆翦灭率较小。而水解的光阴过长则会导致大份子卵白质偏激水解成氨基酸概况是已经不具备生物活性短肽链的物资。

二、应面试验服从

（1）回归方程模子方差合成

单因素试验品评辩说了各个因素对于绿豆多肽抗氧化性的影响，为了周全审核影响因素，仍需判断酶解光阴、酶解温度、pH、酶浓度对于绿豆抗氧化肽的抗氧化性的影响。故接管不断用照应法对于绿豆抗氧化肽提取的工艺妨碍优化。以酶解温度(X₁)、酶解pH(X₂)、酶浓度(X₃)、酶解光阴(X₄)为自变量，DPPH翦灭率的照应面试验服从见表2。温度(X₁)、酶解pH(X₂)与酶浓度(X₃)、酶解光阴(X₄)为自变量，DPPH翦灭率为回应值的照应面试验服从见表2。

凭证照应面试验妄想及着实验服从，需要建树回归方程模子，用于分说各因素之间的交互熏染是否清晰，为用于钻研以及合成绿豆多肽抗氧化性的变更，故而还需分说其倾向的巨细。即试验拟合度与在最佳条件下抗氧化性的适宜水平。绿豆多肽抗氧化性的回归方程模子的方差合成如表3所示。

由表3可知，该回归模子P＜O.000l，方程模子抵达极清晰，失拟项P=0.1471＞0.05，不清晰，剖析模子建树精确。该回归模子的总抉择系R²=0.9568，剖析方程拟合度较好，试验倾向小，故该回归方程模子建树，可能用此模子对于绿豆多肽的抗氧化性妨碍合成及预料。由此模子患上到的此回归方程为：Y=45.24—6.00X₁+1.47X₂—1.35X₃+0.36X₄+1.81X₁X₂—2.60X₁X₃+1.06X₁X₄+0.20X₂X₃一0.17X₂X₄+0.14X₃X₄—4.98X₁²—0.97X₂²—0.70X₃²—0.90X₄²。

（2）照应曲面服从合成

照应面图可反映出各个因素对于绿豆多肽抗氧化性的影响，凭证曲面图的启齿朝向及曲面形态分说在试验规模内是否存在最值、各因素之间的相互熏染是否清晰。

散漫表三、图5及图6可看出，影响DPPH逍遥基翦灭率的先后挨次为：温度(X₁)＞pH(X₂)＞酶浓度(X₃)>酶解光阴(X₄)，X₁、X₂、X₃、X_1³项抵达互极清晰水平(P＜0.01)，X_1²、项抵达清晰水平(P＜0.05)。照应面的最优条件：温度43.47℃，pH为9.19，酶浓度为6.51％，水解光阴为2.22h，DPPH逍遥基翦灭率47.14％。

三、验证实验

为了验证照应面服从的坚贞性，凭证照应面优化出的最佳工艺妨碍三次验证实验。实际患上到的绿豆多肽DPPH翦灭率的平均值是47.03％，与合成值相差0.23％。与照应面预料值较为适宜，剖析照应面患上出的最优条件具备可行性。

三、论断

经由照应面优化试验合成出影响绿豆抗氧化肽的制备因素，这四个因素对于绿豆抗氧化肽提取的影响水平挨次为：酶解温度＞pH＞酶浓度＞酶解光阴。本试验患上出的绿豆抗氧化工艺条件为：酶解温度43.47℃、pH9.1九、酶浓度6.51％、酶解光阴2.22h，在此工艺条件下患上到的绿豆抗氧化肽对于DPPH翦灭率的平均值为47.03％，与软件给出的实际值相差0.23％。本试验对于绿豆抗氧化肽提取条件妨碍了优化，且绿豆多肽的抗氧化性为绿豆多肽在抗氧化食物、保健品等方面的开拓及药理学钻研提供了加倍实用的凭证。

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